Meskipun pemeriksaan radiologi seperti mammogram dan USG dapat menemukan kelainan yang mencurigakan, pemeriksaan ini tidak bisa mendiagnosa secara pasti suatu kanker. Biopsi adalah satu-satunya cara untuk mengetahui secara pasti apakah perubahan pada payudara adalah kanker.
Biopsi adalah tindakan mengambil sebagian kecil atau seluruh jaringan/benjolan payudara yang dicurigai abnormal untuk dapat diperiksa di bawah mikroskop. Pengambilan jaringan dapat dilakukan dengan jarum maupun operasi. Jenis biopsi tergantung pada ukuran dan lokasi dari daerah benjolan atau daerah abnormal yang dicurigai.